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要減輕Elisa試劑盒的基質(zhì)效應,要懂得這些檢測操作要點

更新時間:2022-03-26 點擊次數(shù):1131次
  我們在ELISA試劑盒實驗中,有時會遇到樣品濃度挨近試劑盒的靈敏度就容易發(fā)生樣本OD450值低于空白值的現(xiàn)象,特別是在血清和血漿樣本中。這就有可能是基質(zhì)效應導致的結(jié)果?;|(zhì)效應可以通過產(chǎn)品研發(fā)階段的優(yōu)化盡可能去去除的。
  ELISA試劑盒在開發(fā)進程中,標準品不選用人或動物血清、血漿作為標準曲線的稀釋液,只能選用其仿照物。我們量身定制的緩沖液系統(tǒng),這些優(yōu)化后的緩沖液體系能很好去除基質(zhì)效應。還有當檢測某個分析物時,其他相關(guān)因子或類似結(jié)構(gòu)因子如果有非特異性結(jié)合,也會導致基質(zhì)效應,我們也因此做了大量的交叉反應,確保沒有明顯的交叉反應和干擾。
  檢測操作要點:
  1、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。一切試劑瓶蓋須蓋緊以避免蒸騰和污染,試劑避免受到微生物的污染,由于蛋白水解酶的干擾將導致出現(xiàn)過錯的成果。
  2、當心汲取試劑并嚴格遵守給定的孵育時刻和溫度。請注意在汲取標本/標準品,孔加樣之間的時刻距離假如太大,將會導致不同的 “預孵育”時刻,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。而且,洗滌不充分將影響實驗成果。
  3、試劑盒保存:部分試劑保存于-20℃,部分試劑保存于2-8℃,詳細以標簽上的標明為準。
  4、濃洗滌液會有鹽分出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
  5、剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少量水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗成果形成任何影響。
  6、中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準。
  7、一切的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

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